文章背景简介

BACKGROUND INTRODUCTION

肝癌（HCC）是最难治的恶性肿瘤之一，特别是当它进展到晚期并且手术切除不再可行时，化疗基本上就是这些患者可用的唯一选择。依托泊苷（VP16）和喜树碱（CPT）是临床上常用的化疗药物，可诱导癌细胞DNA损伤并导致细胞凋亡。然而，由于突变的积累，大多数HCC细胞中的DNA修复系统异常活跃、DNA修复能力提高，导致化疗效果差。最近的研究表明，当癌细胞中的DNA修复途径被阻断时，化疗和放疗的效果可以被显著增强，因此，一些DNA修复阻断剂已被广泛用于临床治疗，这类药物可以减少化疗药物的剂量，提高其治疗效果。

DNA损伤修复是维持染色体稳定性的重要机制，DNA修复过程中蛋白质的失调增加了DNA突变的可能性，并会导致细胞死亡或致癌。DNA修复机制可细分为两大类：双链断裂修复（ DSBR ）和单链断裂修复（ SSBR ） 。同源重组（ HR ）是DSBR的主要机制，RAD51是参与这一过程的关键蛋白。RAD51蛋白会结合单链DNA以促进HR完成DNA修复，如果抑制RAD51表达则会强烈阻碍DNA修复过程。因此，许多RAD51抑制剂已被确认为HCC治疗的辅助疗法，并已被证明能增强化疗和放疗的效果。

褪黑素是人脑中松果体分泌的主要激素。 除了调节睡眠－觉醒周期外，褪黑素及其代谢产物还是很强的自由基清除剂，可减少生理代谢过程中产生的过氧化物对细胞造成的损害。此外，褪黑素可以激活免疫，抑制血管生成和细胞生长，并抑制几种癌症的转移。虽然最近有研究报道褪黑素可以抑制肝癌细胞系的生长和转移，但研究结果仅限于细胞实验，其下游调控机制尚不清楚。

2018年，台湾长庚大学的Chin－Chuan Chen等人在《Cancers》（IF＝5．326，医学2区）发表了题为“Melatonin Sensitizes Hepatocellular Carcinoma Cells to Chemotherapy Through Long Non－Coding RNA RAD51－AS1－Mediated Suppression of DNA Repair”的文章。

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所用到的主要方法

METHODS

1．彗星实验：又称单细胞凝胶电泳实验，是由Ostling等于1984年首次提出的一种通过检测DNA链损伤来判别遗传毒性的技术。

2．免疫荧光

3．HR分析

4．全转录组测序

5．小鼠异种移植实验

6．免疫组织化学染色

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文章主要内容摘要

ABSTRACT

大多数肝癌（ HCC ）细胞的DNA修复系统由于累积突变而异常活跃，DNA修复能力提高，从而导致对化疗和放疗的抵抗。因此，靶向DNA修复机制是HCC中常见的治疗方法，可以增强癌细胞对DNA损伤的敏感性。在这项研究中，作者分析了褪黑素的抗HCC作用并阐明了其调节机制。功能分析实验结果表明：褪黑激素除抑制HCC细胞的增殖、迁移和侵袭能力外，还会抑制其DNA修复能力，从而促进化疗和放疗的细胞毒性。全转录组与功能获得及丧失分析显示：褪黑素会诱导长链非编码RNA（LncRNA）RAD51－AS1的表达，该LncRNA可与RAD51 mRNA结合并抑制其翻译，从而有效降低HCC细胞的DNA修复能力，提高其对化疗和放疗的敏感性。动物模型进一步证明，与单一疗法相比，褪黑素和化疗药物依托泊苷（VP16）的组合可显著抑制肿瘤生长。我们的研究结果表明，褪黑素是HCC化疗和放疗的潜在辅助治疗方法。